(hiv)艾滋病病毒初篩實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本管理制度
(一)、樣品的采集和處理
艾滋病檢測(cè)最常用的樣品是血液,包括血清、血漿和全血。唾液或尿液有時(shí)也可作為測(cè)試樣品。常用的血液樣品的采集和處理方法如下:
1、血清樣品采集和處理
(1)、用一次性注射器(或真空采血管)抽取一定量靜脈血,室溫下自然放置12h,待血液凝固、血塊收縮后再用3000r/min離心15min,吸出血清備用。
(2)、如用濾紙片采樣,則手指或耳垂局部嚴(yán)格按常規(guī)進(jìn)行消毒,在刺破皮膚后,迅速把濾紙片沾上,切勿讓血液滴落在其它物體表面造成污染。采血后要待血樣干燥后再包裝送檢。
2、抗凝血樣品采集和處理
(1)、用加有抗凝劑的真空采血管(或一次性注射器抽取靜脈血,轉(zhuǎn)移至加有抗凝劑的試管),反復(fù)輕搖,分離血漿和血細(xì)胞備用。
(2)、應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求選用適當(dāng)?shù)目鼓齽?如cd4+/cd8+t淋巴細(xì)胞測(cè)定可選用k3edta或肝素或枸櫞酸鈉,hiv病毒分離、核酸定性/定量檢測(cè)可選用k3edta或枸櫞酸鈉。
(3)、用于核酸定性檢測(cè)時(shí),采集的抗凝全血應(yīng)在4~8h內(nèi)分離pbmc和血漿,否則應(yīng)在24~48h內(nèi)分離血漿和血細(xì)胞。
3、采集樣品注意事項(xiàng)
(1)、采集樣品原則上應(yīng)按臨床采血技術(shù)規(guī)范操作。
(2)、采集樣品時(shí)應(yīng)注意安全,建議采用真空采血管及蝶形針具,以避免直接接觸血液;直接接觸hiv感染者/艾滋病(aids)病人血液/體液的操作,應(yīng)戴雙層手套。
(3)、所有的血液、血清、未固定的組織和組織液樣品,均應(yīng)視為有潛在傳染性,都應(yīng)以安全的方式進(jìn)行操作。
(4)、應(yīng)象操作未知傳染風(fēng)險(xiǎn)樣品一樣,小心存放、拿取和使用所有可能有傳染性的質(zhì)量控制和參考物質(zhì)。用后的包裹應(yīng)進(jìn)行消毒。
(5)、采血時(shí)一定要注意安全,采血用一次性注射器,謹(jǐn)慎操作,防止發(fā)生刺傷皮膚和造成外界污染。
(6)、離心機(jī)要使用密閉的罐和密封頭,以防液體溢出或在超/高速離心時(shí)形成氣溶膠。
(二)樣品的保存
1、用于抗體檢測(cè)的血清或血漿樣品,應(yīng)存放于-20℃以下,短期(1周)內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)的樣品可存放于2-8℃。
2、用于抗原和核酸檢測(cè)的血漿和血細(xì)胞樣品應(yīng)凍存于-20℃以下,進(jìn)行病毒rna檢測(cè)的樣品如需保存3個(gè)月以上應(yīng)置于-80℃。
3、用于cd4+/cd8+t淋巴細(xì)胞測(cè)定的樣品不能長(zhǎng)期保存,樣品采集時(shí)間超過48h則不可檢測(cè)。
(三)樣品的運(yùn)送
1、實(shí)驗(yàn)室間傳遞的樣品應(yīng)為血清或血漿,除特殊情況外一般不運(yùn)送全血。
2、應(yīng)采用who提出的三級(jí)包裝系統(tǒng):
第一層容器:裝樣品,要求防滲漏。樣品應(yīng)置于帶蓋的試管內(nèi),試管上應(yīng)有明顯的標(biāo)記,標(biāo)明樣品的編號(hào)或受檢者姓名、種類和采集時(shí)間。在試管的周圍應(yīng)墊有緩沖吸水材料,以免碰碎。隨樣品應(yīng)附有送檢單,送檢單應(yīng)與樣品分開放置。
第二層容器:要求耐受性好、防滲漏、容納并保護(hù)第一層容器,可以裝若干個(gè)第一層容器。將試管裝入專用帶蓋的容器內(nèi),容器的材料要易于消毒處理。
第三層容器:放在一個(gè)運(yùn)輸用外層包裝內(nèi),應(yīng)易于消毒。在第三層容器外面要貼標(biāo)簽(數(shù)量,收、發(fā)件人)。
3、血清和血漿樣品應(yīng)在2~8℃條件下由專人運(yùn)送。用于cd4+/cd8+t淋巴細(xì)胞測(cè)定的樣品應(yīng)在室溫下18~23℃運(yùn)送。每一包裝的體積以不超過50ml為宜。
4、運(yùn)送感染性材料必須有記錄。
5、如分離血漿仍有困難,可直接將抗凝血-20℃以下凍存,采用冰壺冷藏運(yùn)輸,避免凍融。
6、特殊情況下如需對(duì)個(gè)別樣品進(jìn)行復(fù)測(cè),可以用特快專遞形式投寄,但必須按三級(jí)包裝系統(tǒng)將盛樣品的試管包扎好,避免使用玻璃容器,以保證不會(huì)破碎和溢漏。
(四)樣品的接收
1、含有感染性樣品的包裹必須在具有處理感染源設(shè)備的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)由經(jīng)過培訓(xùn)的、穿戴防護(hù)衣的工作人員打開,用后的包裹應(yīng)進(jìn)行消毒。
2、核對(duì)樣品與送檢單,認(rèn)真核對(duì)標(biāo)本上病人姓名、年齡、性別、病區(qū)、床號(hào)、住院號(hào)是否與申請(qǐng)單符合。檢查樣品管有無破損和溢漏,如發(fā)現(xiàn)溢漏應(yīng)立即將尚存留的樣品移出,對(duì)樣品管和盛器消毒,同時(shí)報(bào)告有關(guān)領(lǐng)導(dǎo)和專家。
3、檢查樣品的狀況,觀察標(biāo)本的量、標(biāo)本類型、是否抗凝或有小凝塊樣品,記錄有無嚴(yán)重溶血、微生物污染、血脂過多以及黃疸等情況,判斷標(biāo)本是否符合檢驗(yàn)要求。如果污染過重或者認(rèn)為樣品不能被接受,則應(yīng)將樣品安全廢棄。并要將樣品情況立即通知送樣人。
4、打開標(biāo)本容器時(shí)要小心,以防內(nèi)容物潑濺。樣品處理時(shí)若內(nèi)容物有可能濺出,則應(yīng)在生物安全柜中戴手套進(jìn)行。同時(shí)應(yīng)戴口罩、防護(hù)眼鏡,以防皮膚或粘膜污染。
5、因特殊臨床治療導(dǎo)致自發(fā)熒光的樣品不可用于熒光方法測(cè)試。
6、接收樣品時(shí)應(yīng)規(guī)范填寫樣品接收單。
7、不符要求的標(biāo)本,必須及時(shí)填寫退回理由單,及時(shí)通知送樣人,說明情況,重新留取。不符要求的標(biāo)本與可疑含有感染性樣品用后的包裹同檢驗(yàn)后的標(biāo)本一樣進(jìn)行消毒或無害化處理后廢棄。
(五)標(biāo)本檢測(cè)
1、離心機(jī)要使用密閉的罐和密封頭,以防液體溢出或在超/高速離心時(shí)形成氣溶膠。復(fù)核標(biāo)本接收過程中的每一步驟,在檢測(cè)過程中,應(yīng)嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程。
2、在標(biāo)本足夠的情況下,不能浪費(fèi)、隨意丟棄或損壞標(biāo)本。應(yīng)象操作未知傳染風(fēng)險(xiǎn)樣品一樣,小心存放、拿取和使用所有可能有傳染性的質(zhì)量控制和參考物質(zhì)。用后的包裹應(yīng)進(jìn)行消毒
(六)、標(biāo)本處理
檢驗(yàn)標(biāo)本先用含2-3g/l有效氯消毒劑浸泡半小時(shí),再用高壓鍋高壓消毒。然后用雙層專用黃色醫(yī)用垃圾袋專人收集所有廢棄醫(yī)用垃圾。送專門存放醫(yī)用垃圾處統(tǒng)一焚化處理。并做好登記。
